実験動物から採取された材料を用いた組織標本作製依頼
当施設では、研究を目的とする病理組織標本の作製を請け負っております。
一部の工程のみ（ブロック作製のみ等）でも受託可能です。
 受付
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 受渡 |
受付
検体が依頼内容に耐え得るかを確認の上、検体をお預かりします。
作業工程は不可逆的です。
特に液浸固定標本を提出される際は、研究者ご本人がお越しください。
研究者の研究情報保護を目的として、受付は予約制となっております。
予約・問い合わせ先はこちら
当施設で取り扱う検体は、固定液等で固定済みであることを原則としています。
組織の固定方法については、こちらをご参照ください。
「人体組織（研究目的に限る）」「ヒト由来細胞を含む材料」を提出される方は、
あらかじめお問い合わせください。
ブロック作製
受付時に伺った観察面に沿って、
ブロックを作製します。
当施設では、以下の2種類に対応しています。
持ち込み抗体を使用した免疫染色をお考えの際は、あらかじめ
使用される抗体のデータシートをご確認ください。
なお、未固定組織の凍結ブロック作製はお受けしておりません。
| パラフィンブロック | 凍結ブロック |
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常温で半永久的に保管することができます。 |
凍結保管が必要な上、保管中は組織の乾燥が |
その他
| TMAブロック作製 | 大型組織標本作製 |
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パラフィンブロックを円柱（コア）状に抜き取り、集約して１ブロックとして再包埋します。 |
大型組織のパラフィンブロック作製も可能です。 |
薄切
ブロックを薄切し、スライドガラス等に貼り付けます。
当施設以外で作製されたブロックの薄切も承ります。
薄切面の指定や、指定間隔での多段階薄切（ステップカット）にも
対応しております（別料金）。
未染色スライドをご希望の際は、薄切条件(※)を確認いたします。
以下を参照の上、目的に応じた薄切条件をご指定ください。
※ 薄切条件 ： “切片厚” ”スライドの種類” ”乾燥・保管方法”
切片厚
観察対象や使用目的によって、標本の厚さを変更できます。
| パラフィンブロック | 凍結ブロック | |
| 顕微鏡観察用 | その他（DNA抽出用など） | |
| 通常、3～4μmに薄切します。 | 5～10μmに薄切します。 組織によって、5μm×2枚と なる場合もあります。 |
6～10μmに薄切します。 |
スライドの種類
薄切した切片を貼り付けるスライドガラスには、以下の種類があります。
持ち込みスライドの場合は、受付時にご持参ください。
| 剥離防止コーティング 無し | 剥離防止コーティング 有り | 持ち込みスライド （フィルム等） |
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スライドガラスから剥離させる 例：DNA抽出 |
形態的観察に用いる際に 例：免疫染色 |
左記以外は当施設に 用意がありません。 受付時に必要枚数分を ご持参ください。 例：マイクロダイセクション用 |
乾燥・保管方法
スライドガラスへの貼り付け後は、57～58℃前後で1晩静置します。
58℃以外での乾燥をご希望の際は、その旨をお伝えください（別料金）。
標本作製の目的が核酸抽出などの場合、品質保持のため常温での乾燥をお勧めします。
乾燥後は室温で保管します。4℃での保管も可能です。
染色
顕微鏡で観察しやすいように、組織を染色します。
染色実績に記載がない際は、事前にお問い合わせをお願いいたします。
一般染色
細胞の”核”と”細胞質”を染め分けるHaematoxylin & Eosin（HE）染色は、
組織形態を観察するために最も一般的な染色方法です。
HE染色の結果を基に、必要な特殊染色や免疫染色などが決定されます。
特殊染色
各種染色液を用いて観察対象を染め分けます。
染色実績に記載がない際は、事前にお問い合わせをお願いいたします。
| 【染色実績一覧】 |
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| 軟骨染色 | サフラニンO染色 トルイジンブルー染色 |
| 内分泌細胞の染色 | グリメリウス染色 ゴモリのアルデヒドフクシン染色 フォンタナ・マッソン染色 |
| 脂肪染色 | オイルレッドO染色 |
| 結合組織染色 |
膠原線維
弾性線維
細網線維
線維素
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| 神経染色 | クリューバー・バレラ染色 ビルショフスキー染色 燐タングステン酸ヘマトキシリン染色（PTAH) |
| 細胞内色素の染色 |
リプフスチン
メラニン
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| 無機物染色 |
カルシウム
鉄
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| 多糖類染色 |
グリコーゲン、中性ムコ多糖類
酸性ムコ多糖類
中性粘液
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| アミロイド染色 | コンゴーレッド染色 ダイレクト・ファースト・スカーレット染色 |
| 細胞内病原体の染色 | グラム染色 グロコット染色 チールネルゼン染色 ビクトリアブルー染色 |
※ 下線がひかれたものは、銀を用いた染色になります。
酵素染色
組織内に局在する酵素を染め分けます。
酵素染色を希望される際は、あらかじめお問い合わせをお願い致します。
免疫染色
免疫抗体を用いて、特定の抗原のみを染色します。
・免疫２重（3重）染色
・蛍光での発色
・特殊染色との重染色 にも対応しています。
当施設では、下表の抗体を用意しております。
その他の抗体については、研究者ご自身でお手配ください。
なお、抗体の購入について、当施設では斡旋しておりません。
抗体毎の染色条件の検討も受託しております。条件検討には日数を要します。ご了承ください。
| 抗ヒト抗体 （ヒトの組織および細胞用抗体） |
抗マウス抗体 （マウスの組織および細胞用抗体） |
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| AE1/AE3 | CMV | CD3 |
| Amyloid A protein | D2-40 | CD31 |
| Androgen receptor | Desmin | CD4 |
| α-smooth muscle actin (α SMA) | E-cadherin | CD8 |
| bcl-2 | EGFR | F4/80 |
| Calretinin | ER | Ki-67 |
| CD10 | Foxp3 | |
| CD105 (endoglin) | Glucagon | |
| CD15 (Leu M1) | Granzyme B | |
| CD20 (L26) | hCG (hCGβ) | 抗ラット抗体 （ラットの組織および細胞用抗体） |
| CD25 | Insulin | |
| CD3 (PS-1) | Ki-67 | BrdU |
| CD30 (Ki-1, Ber-H2) | LCA (CD45RB) | |
| CD31 | MMP9 | |
| CD34 | Myeloperoxidase | 全動物種 共通 （ヒト含むあらゆる動物種に適用） |
| CD4 | Myoglobin | |
| CD5 | NeuN | ssDNA |
| CD56 | NSE (Neuron specific enolase) | |
| CD68 | p53 | |
| CD79a | PGR | Negative Control |
| CD8 | PSA | |
| CK AE1/3 | STEM121 | Mouse IgG1 |
| CK18 | Synaptophysin | Mouse IgG2a |
| CK19 | Thyroglobulin | Mouse IgG2b |
| CK20 | TTF-1 | Mouse IgM |
| CK5/6 | UCHL1 (CD45RO) | Rabbit IgG |
| CK7 | Vimentin | Rat IgG2a |
| c-kit (CD117) | ||
作業は「VENTANA DISCOVERY ULTRA」または用手法で実施します。
撮影・解析
蛍光顕微鏡での撮影
当施設では簡易型の蛍光顕微鏡を用意しております。
観察時の波長などは変更できません。
詳細な観察をご希望の方は、医学研究支援センター共用利用機器の活用をご検討ください。
https://support-center.med.kyoto-u.ac.jp/SupportCenter/
Virtualスライド化（WSI取り込み）
組織標本のデジタル化を承っております。
破損・褪色の心配がなく、多人数での供覧が容易となります。
データの受渡に使用するUSB接続ストレージデバイスは、依頼者がご用意ください。
画像解析ソフトウェア HALO
染色標本の画像解析ソフトウェア「HALO」をご用意しております。
解析の際は、依頼者ご自身で操作していただきます。
https://www.indicalab.com/halo/
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受渡
作業が完了しましたら、メールにてお知らせいたします。
スライドガラスのお渡し時には標本箱を貸与いたしますので、
2週間以内のご返却をお願いいたします。
返却不要の標本箱もご用意しております（有料）。
VENTANAは、スイスおよび他の国々で登録されたF. Hoffmann-La Roche AG.の登録商標です。
HALOは、米国および他の国々で登録されたIndica labs Inc.の登録商標です。